電(dian)熱(re)培養箱的保養方(fang)法以及(ji)其(qi)特(te)點(dian)

 

　　1、顯(xian)微(wei)鏡：倒置(zhi)式(shi)顯(xian)微(wei)鏡是(shi)細胞(bao)培養實(shi)驗(yan)室日常工(gong)作常規*設(she)備(bei)，主(zhu)要用於日(ri)常了(le)解(jie)細(xi)胞(bao)的生長情(qing)況並(bing)觀(guan)察(cha)有(you)無(wu)汙染(ran)發生。如資金允(yun)許(xu)，建議(yi)選(xuan)用配(pei)置有(you)照(zhao)相(xiang)系(xi)統(tong)的高品質相(xiang)差顯(xian)微(wei)鏡、解(jie)剖(pou)顯(xian)微(wei)鏡、熒(ying)光顯(xian)微(wei)鏡、錄(lu)像(xiang)系統(tong)或(huo)縮(suo)時(shi)電(dian)影(ying)拍(pai)攝裝(zhuang)置(zhi)等(deng)，可(ke)隨時(shi)拍(pai)攝並(bing)記(ji)錄(lu)細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)情(qing)況。

 

　　超(chao)凈(jing)工(gong)作臺：目(mu)前絕大(da)部分(fen)細胞(bao)實(shi)驗(yan)室使用超(chao)凈(jing)工(gong)作臺實(shi)現無(wu)菌操(cao)作(zuo)，具(ju)有(you)操作簡單、安裝方(fang)便、占用空(kong)間(jian)小(xiao)且(qie)凈(jing)化(hua)效(xiao)果很好。超(chao)凈(jing)工(gong)作臺主(zhu)要有兩種——側流(liu)式(shi)（垂(chui)直(zhi)式(shi)）和外(wai)流(liu)式(shi)（水(shui)平層流(liu)式(shi)）。工(gong)作原理壹般(ban)是(shi)將(jiang)室內(nei)空氣(qi)經粗過濾(lv)器初(chu)濾(lv)，由離心風(feng)機(ji)壓(ya)入(ru)靜(jing)壓(ya)箱，再(zai)經空氣(qi)過(guo)濾(lv)器(qi)精濾，由此(ci)送(song)出(chu)的潔凈氣(qi)流(liu)以壹定(ding)的均勻的斷面(mian)風(feng)速(su)通過(guo)無(wu)菌區(qu)，從而(er)形(xing)成(cheng)無(wu)塵無(wu)菌的高潔凈度(du)工(gong)作環(huan)境。

 

　　2、（1）側流(liu)式(shi)工(gong)作臺：空(kong)氣(qi)凈(jing)化(hua)後(hou)的氣(qi)流(liu)由左或(huo)右側通過工(gong)作臺面(mian)流(liu)向(xiang)對(dui)側，也有從上(shang)向下(xia)或從下(xia)向(xiang)上(shang)流(liu)向(xiang)對(dui)側，形(xing)成(cheng)氣(qi)流(liu)屏(ping)障(zhang)保持(chi)工(gong)作區無(wu)菌，工(gong)作臺結(jie)構(gou)為(wei)封閉式；

 

　　（2）外(wai)流(liu)式(shi)工(gong)作臺：凈(jing)化(hua)後(hou)的空氣(qi)面(mian)向(xiang)操(cao)作(zuo)者(zhe)流(liu)動，因(yin)而外(wai)方(fang)氣(qi)流(liu)不致(zhi)混入操作，工(gong)作臺結(jie)構(gou)為(wei)開放式(shi)，但(dan)進行有害(hai)物質實(shi)驗(yan)操(cao)作對操作(zuo)者(zhe)不利(li)。超(chao)凈(jing)工(gong)作臺應(ying)需(xu)要定期(qi)請有(you)關(guan)部門檢查潔凈度(du)，符(fu)合要求的超(chao)凈(jing)工(gong)作臺其(qi)潔凈度(du)應(ying)達(da)到(dao)100級(ji)，用塵埃(ai)粒(li)子(zi)計(ji)數儀(yi)檢測粒(li)徑(jing)≤5μm的塵埃(ai)粒(li)子(zi)數量不應(ying)超(chao)過(guo)3.5個(ge)/L；空氣(qi)流(liu)量應控(kong)制(zhi)在(zai)0.75-1.0m3/s；細(xi)菌菌(jun)落數平均(jun)<1個(ge)，根(gen)據(ju)無(wu)菌狀(zhuang)況必(bi)要時(shi)需(xu)要置換過濾(lv)器(qi)。

 

　　3、培養箱：體(ti)外(wai)培養的細胞(bao)和(he)體(ti)內(nei)細胞(bao)壹樣(yang)，需(xu)要在恒(heng)定(ding)的溫度下(xia)生存(cun)，壹般(ban)適生(sheng)長(chang)溫度(du)為37℃，溫差變(bian)化(hua)不應(ying)超(chao)過(guo)±0.5℃。溫度(du)升(sheng)高2℃時(shi)，變(bian)不利(li)於細(xi)胞(bao)生(sheng)存(cun)，溫度(du)達(da)到(dao)40℃以上(shang)細胞(bao)將(jiang)很快(kuai)死亡(wang)。因此(ci)，可(ke)控(kong)溫的恒(heng)溫(wen)培養箱、CO2培養箱是(shi)選(xuan)擇(ze)。

 

　　（1）恒(heng)溫(wen)培養箱：應選(xuan)隔(ge)水(shui)式或晶體(ti)管式(shi)自控(kong)溫培養箱，此(ci)類培養箱靈敏度(du)高，溫度控(kong)制(zhi)較(jiao)穩(wen)定(ding)。壹般(ban)的恒(heng)溫(wen)培養箱價(jia)格(ge)較(jiao)便(bian)宜(yi)，其(qi)缺(que)點(dian)是(shi)只宜(yi)於作(zuo)密閉式(shi)培養。

 

　　（2）CO2培養箱：目前多(duo)數的細胞(bao)培養室已廣(guang)泛使(shi)用(yong)。CO2培養箱的優(you)點(dian)是(shi)能(neng)夠(gou)提(ti)供(gong)進行細胞(bao)培養時(shi)所(suo)需(xu)要的壹定(ding)量的CO2（常用濃度為5％），易於穩(wen)定培養液pH，適用(yong)於開放或(huo)半開放培養。使(shi)用培養瓶(ping)時(shi)，為使(shi)培養瓶(ping)內(nei)與(yu)外(wai)界(jie)保(bao)持(chi)通氣(qi)狀(zhuang)態(tai)，可(ke)將(jiang)瓶(ping)蓋(gai)略(lve)微(wei)旋松，為(wei)避免(mian)細胞(bao)被(bei)汙染(ran)，使(shi)用(yong)這種(zhong)培養方(fang)式時(shi)，培養箱內(nei)空氣(qi)必(bi)須(xu)保持(chi)清潔，需(xu)定(ding)期(qi)用紫(zi)外(wai)線照(zhao)射(she)或酒(jiu)精消毒，同(tong)時(shi)培養箱內(nei)應放(fang)置(zhi)盛有(you)無(wu)菌蒸(zheng)餾(liu)水(shui)的水(shui)槽，防(fang)止(zhi)培養液蒸(zheng)發，保持(chi)箱內(nei)相(xiang)對(dui)濕度(du)在100%。

 

　　（3）細胞(bao)培養耗(hao)材：培養細(xi)胞(bao)的器皿可(ke)用培養皿(min)、培養板(ban)或培養瓶(ping)，萊(lai)貝(bei)在本篇(pian)不做(zuo)詳(xiang)細(xi)介紹(shao)，這部分(fen)知識(shi)會(hui)在實(shi)驗(yan)室耗(hao)材知(zhi)識(shi)部分(fen)作重(zhong)點(dian)介紹(shao)。

 

　　4、烘箱（幹(gan)燥箱）：電(dian)熱(re)培養箱用於細(xi)胞(bao)培養的壹些(xie)器械(xie)、器(qi)皿(min)必(bi)須(xu)烘幹(gan)後(hou)才能(neng)使(shi)用(yong)，玻璃(li)器皿(min)等(deng)須(xu)幹(gan)熱(re)消毒。幹(gan)熱(re)消毒時(shi)，烘箱內(nei)溫度(du)壹般(ban)要達(da)到(dao)160℃以上(shang)，通常使用(yong)鼓(gu)風(feng)式(shi)烘箱。其(qi)優(you)點(dian)是(shi)溫度(du)均(jun)勻、效(xiao)果(guo)較(jiao)好(hao)，缺(que)點(dian)是(shi)升(sheng)溫(wen)過程(cheng)較(jiao)慢(man)。升(sheng)溫(wen)時(shi)不能(neng)先(xian)升(sheng)溫(wen)後(hou)鼓風(feng)而應(ying)鼓風(feng)與(yu)升(sheng)溫(wen)同時(shi)開始，至(zhi)100℃時(shi)，停止(zhi)鼓(gu)風(feng)。需(xu)註(zhu)意(yi)避免(mian)包(bao)裹(guo)器皿(min)的紙(zhi)或棉(mian)花燒焦(jiao)，燒(shao)焦(jiao)的碎屑可(ke)影響(xiang)細(xi)胞(bao)的生長。消毒後(hou)不能(neng)立(li)即(ji)打(da)開箱門，以免(mian)驟冷(leng)導致(zhi)玻璃(li)器皿(min)破裂，應(ying)等(deng)溫(wen)度(du)自(zi)然下(xia)降(jiang)至100℃以下後(hou)可(ke)開門。

 

　　5、水(shui)純(chun)化(hua)裝(zhuang)置：細胞(bao)培養對(dui)水(shui)的質量要求較(jiao)高，細胞(bao)培養、細(xi)胞(bao)培養相(xiang)關(guan)液體(ti)的配制(zhi)用(yong)水(shui)以及(ji)清洗細(xi)胞(bao)培養器(qi)皿用(yong)水(shui)都必(bi)須(xu)事先(xian)經過嚴格(ge)的純(chun)化(hua)處(chu)理。目前有(you)多(duo)種(zhong)純(chun)化(hua)方(fang)法相(xiang)結(jie)合，可(ke)使普(pu)通水(shui)純(chun)化(hua)為(wei)純(chun)水(shui)和超(chao)純(chun)水(shui)的純(chun)水(shui)裝置使用(yong)非常靈活(huo)方(fang)便，可(ke)掛壁式、臺式(shi)、可(ke)配儲(chu)水(shui)箱、也可(ke)直接(jie)用分(fen)液槍(qiang)、還可(ke)根(gen)據(ju)各類(lei)實(shi)驗(yan)用(yong)水(shui)要求選(xuan)擇(ze)配(pei)置殺菌功能(neng)，有(you)效(xiao)去除DNA酶、RNA酶、蛋(dan)白酶等(deng)，更(geng)有(you)可(ke)有效(xiao)去除掉熱(re)源、內(nei)毒素(su)的超(chao)濾(lv)型(xing)純(chun)水(shui)裝置。

 

　　6、冰箱：電(dian)熱(re)培養箱備(bei)設(she)備(bei)，應(ying)，不得(de)存(cun)放易揮(hui)發、易燃(ran)燒等(deng)對(dui)細(xi)胞(bao)有(you)害(hai)的物質，且(qie)應(ying)保(bao)持(chi)清潔。壹般(ban)包(bao)括(kuo)普通(tong)冰(bing)箱、低溫冰(bing)箱和超(chao)低(di)溫冰(bing)箱。（1）普通冰(bing)箱：儲(chu)存(cun)培養液、生(sheng)理鹽水(shui)、Hanks液試(shi)劑等(deng)培養用(yong)的物品，可(ke)短期(qi)保存(cun)組織樣(yang)本(ben)。（2）-20℃低(di)溫冰(bing)箱、超(chao)低(di)溫冰(bing)箱：用於儲(chu)存(cun)需(xu)要冷(leng)凍以保持(chi)生物活(huo)性以及(ji)需(xu)長(chang)時(shi)期(qi)存(cun)放的制(zhi)劑(ji)，如酶、血清等(deng)。